实验室中如何防止细胞培养基污染？华晨阳防污染指南

从污染源头到预防措施，一文掌握实验室中细胞培养基污染的常见原因及解决方法。

细胞培养基污染的常见原因

防止细胞培养基污染需首先识别四大污染源头：

1. 微生物污染（占比>60%）：细菌、真菌、支原体通过空气或操作引入；
2. 交叉污染：不同细胞系共用器材导致；
3. 试剂污染：血清、培养基灭菌不彻底；
4. 环境因素：超净台UV未开启、培养箱水盘未消毒。

🔬 华晨阳数据：其预过滤培养基（0.22 μm除菌）污染率<0.1%

实验室环境控制与消毒

三级防护体系

⚠️ 关键点：

• 定期更换HEPA过滤器（建议1次/年）；
• 禁止在细胞房内进行非培养操作（如包装拆封）。

培养基保存与使用注意事项

华晨阳培养基的防污染保存方案：

1. 未开封：
   • 干粉：室温避光，保质期2年；
   • 液体：2–8℃避光，保质期12个月。
2. 开封后：
   • 分装至50 mL离心管，-20℃保存≤3个月；
   • 添加双抗（青霉素100 U/mL + 链霉素100 μg/mL）延长使用期。

💡 使用技巧：

• 水浴预热至37℃时勿开盖，防止冷凝水污染；
• 瓶口火焰灼烧后再移液。

无菌操作技巧与个人防护

六步无菌操作法

1. 穿戴实验服、口罩及无菌手套；
2. 超净台内器材摆放呈“品”字形（污染区→操作区→洁净区）；
3. 移液枪酒精棉包裹，枪头避免触碰管壁；
4. 培养瓶开盖角度≤45°，操作时间<30秒；
5. 定期火焰消毒镊子、瓶口；
6. 废弃培养基加入10%次氯酸钠灭活。

🧪 华晨阳建议：每月进行人员操作考核

污染检测与处理方法

污染识别表

📌 检测工具：

• 快速PCR检测盒（检出限1 CFU/mL）；
• 华晨阳培养基含酚红指示剂，pH异常（变紫/黄）时预警。

常见问题与故障排除

问题1：反复污染找不到原因

• 排查步骤：
  1. 检测水浴锅水质（更换为无菌水）；
  2. 验证灭菌锅效率（生物指示剂测试）；
  3. 检查培养箱CO₂传感器（误差需<0.5%）。

问题2：细胞状态差但无污染

• 可能原因：培养基过期或储存不当；
• 解决：更换华晨阳新批次培养基（质检报告可索要）。

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延伸阅读：

• 华晨阳培养基产品页