细胞培养基污染了怎么办？快速判断与处理方法

细胞状态毫无征兆地恶化，镜下形态异常，实验结果无规律波动……这些困扰很可能是由无形的入侵者——细胞培养基污染所导致。掌握快速识别与科学处理的技能，是每位研究者的必修课。🔬

① 5 分钟肉眼初筛：浑浊、沉淀、色泽变化分别提示哪种污染？

首先，别急着上显微镜！肉眼观察是污染判断的第一步。拿起培养瓶对光观察：如果培养基整体呈现浑浊、云雾状，静置后无明显沉淀，这常是细菌污染的特征。若出现沉淀，但培养基仍清亮，轻摇后沉淀飘起如“雪花”，可能提示真菌（霉菌）污染。而培养基色泽无故变黄（酚红指示剂提示pH下降）且短期内反复发生，即使无肉眼可见浑浊，也需警惕潜在的慢速微生物污染。👀

这些迹象是重要的警报，但确诊需要更精密的工具。

②显微镜 400× 一看就知：黑点多、丝状、原地抖动，对应细菌、真菌还是支原体？

将可疑培养基样本（或培养上清）制成压片，在普通光学显微镜400倍镜下观察。视野中如果出现大量黑点状物体，并且在高倍镜下可见其在布朗运动（随机抖动），这通常是细菌。若观察到丝状、树枝状或孢子状结构，则指向真菌污染。😨

最隐蔽的敌人是支原体，它无细胞壁，不引起培养基明显浑浊。镜下观察感染细胞，可能发现细胞形态异常、颗粒增多、生长减缓，但背景相对“干净”。此时，细胞的异常状态本身成为重要线索，但确诊需专门方法。

③快速检测试剂盒对比：培养法、PCR、荧光法，时间与灵敏度一目了然

当疑似污染时，使用快速检测工具能避免误判。常用方法有三类：培养法（如肉汤培养）耗时较长（数天至数周），但结果直观；PCR法特异性高、灵敏度好，可在几小时内检测出极低载量的微生物（如支原体）；荧光染色法（如Hoechst染色）快速简便，半小时左右可通过荧光显微镜观察附着于细胞表面的支原体DNA。🕒

选择哪种方法取决于您的需求：追求速度与高通量筛查可选PCR；需要直观证据且样本量不大时，荧光法是不错的选择。

④应急处理 SOP：立即隔离、丢弃还是补救？华晨阳 3 级污染处置流程

一旦确认或高度怀疑污染，果断行动是关键。我们建议遵循 “3级污染处置流程”：

• 一级（轻度/疑似）：立即将污染器皿与其他培养物物理隔离，放入专用生物安全袋或容器。操作台面及周边进行彻底消毒。
• 二级（明确污染）：对于非珍贵、可替代的细胞系，最稳妥的方法是立即丢弃所有污染培养物及共用过的培养基、试剂，并对培养箱进行彻底清洁消毒。这是控制污染扩散的核心。🚨
• 三级（珍贵细胞污染）：可尝试使用商业化的污染处理试剂（如抗生素鸡尾酒、支原体清除剂）进行抢救，但成功率不确定，且可能改变细胞特性。抢救期间必须严格隔离，并需在清除处理后重新进行无菌检测。

⑤“防”大于“治”：华晨阳 0.1 μm 过滤+辐照即用培养基如何把污染率降到 <0.3%

应对污染，最高效的策略是预防。从源头确保培养基的无菌性至关重要。华晨阳采用的 “双重屏障”生产工艺：首先通过0.1 μm除菌级过滤，能有效去除包括支原体在内的绝大多数微生物；后续辅以伽马辐照终端灭菌，为产品提供额外的安全保障。

📊 严格的流程控制使得产品内在污染率得以维持在较低水平（华晨阳内部质控数据，n≥3）。选择此类即用型无菌培养基，能极大降低由培养基本身引入的外源性污染风险，让您的研究更专注于科学问题本身。

污染自查 3 步表，守护细胞实验安全

当实验出现异常，请按此表快速排查：

1. 观察：肉眼观察培养基物理性状（浑浊、沉淀、颜色）。
2. 镜检：400倍镜下观察培养基背景及细胞状态（黑点、丝状物、细胞异常）。
3. 检测：根据镜检结果，选用合适的快速检测方法（PCR/荧光法）进行确诊。

建立规范的污染检测方法和处置SOP，是实验室质量体系的重要组成部分。当然，选择值得信赖的高品质培养基，是从源头上为您的实验增添一份保障。🛡️

我们深知每一次污染的代价。华晨阳致力于通过严格的生产工艺和质量控制，提供安全可靠的细胞培养解决方案。