RPMI-1640 培养基适用细胞类型大全：肿瘤细胞 / 淋巴细胞培养首选

RPMI-1640培养基自问世以来，因其广泛的适用性而成为生命科学研究的基石。了解其广泛的适用细胞类型，尤其是作为肿瘤细胞和淋巴细胞培养的首选方案，对于实验成功至关重要。附可下载细胞选型表，助您快速匹配细胞与培养条件。

理解其设计初衷，是灵活应用的关键。

背景：该培养基于1967年专为淋巴细胞的悬浮培养而设计。其特点是含有高浓度维生素和高缓冲容量的碳酸氢钠系统，能将pH稳定在7.2-7.4的范围内，从而适配大多数哺乳动物细胞。

RPMI-1640对多种重要肿瘤细胞系展现出卓越的兼容性，无论是贴壁还是悬浮生长。

细胞系	生长类型	血清条件	关键添加物	典型倍增时间
HeLa	贴壁	10% FBS	—	24 h
A549	贴壁	10% FBS	—	26 h
K562	悬浮	10% FBS	—	20 h
Jurkat	悬浮	10% FBS	25 mM HEPES	28 h

华晨阳在其适用细胞列表的验证中发现，使用同一瓶RPMI-1640培养基，甚至可以进行贴壁细胞与悬浮细胞的混合培养，在48小时后细胞存活率仍能维持在95%以上，体现了其卓越的通用性。

这是RPMI-1640的传统优势领域，特别适用于免疫细胞的研究与应用。

人外周血单个核细胞（PBMC）：
- 培养条件：接种密度1×10⁶ cells/mL，使用RPMI-1640 + 20% FBS + 1% 青霉素-链霉素。
- 华晨阳验证：在此体系下，PBMC培养72小时存活率可达98%。
CAR-T细胞：
- 优化方案：采用RPMI-1640 + 5% FBS + ITS-X + IL-2进行培养。
- 数据亮点：此优化方案可显著促进细胞增殖，CAR-T细胞的扩增效率能提升40%。同时，华晨阳内部数据显示，细胞因子的分泌能力也同步增强，IL-2的分泌量提升了35%。

除了常规细胞系，RPMI-1640也适用于一些更具挑战性的细胞类型。

原代肿瘤细胞：
- 培养条件：RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 非必需氨基酸（NEAA）。
- 效果：添加NEAA能提供更丰富的营养，使原代细胞的贴壁率提高20%。
293T病毒包装细胞：
- 优化方案：使用RPMI-1640 + 2% FBS + ITS-X进行低血清培养。
- 效果：该条件能维持细胞高活力，从而使得重组病毒的滴度提升30%。
小鼠骨髓来源巨噬细胞（BMDM）：
- 诱导条件：使用RPMI-1640 + 10% L929细胞条件培养基。
- 效果：L929上清提供巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF），在此条件下BMDM的分化率可超过90%。

为方便您根据具体研究方向快速选择，请参考以下矩阵：

应用方向	谷氨酰胺	血清	推荐添加物	华晨阳示例货号
常规肿瘤细胞	Ala-Gln	10% FBS	—	CY-1640-G
淋巴细胞扩增	Ala-Gln	20% FBS	IL-2	CY-1640-L
低血清驯化	Ala-Gln	2% FBS	ITS-X	CY-1640-S
雌激素相关实验	Ala-Gln	10% CSS	酚红-free 基础液	CY-1640-N

误区1：RPMI-1640只能用于悬浮细胞 → 事实是，诸如HeLa、A549等众多常见贴壁细胞在其中生长良好。
误区2：高糖培养基（如DMEM）一定优于中等糖的RPMI-1640 → 对于某些细胞，RPMI-1640的中等糖水平可导致乳酸积累更少，细胞活力更高。
误区3：血清浓度越高，细胞长得越好 → 通过添加ITS-X等补充物，5% FBS的配方即可维持细胞的高增殖率，且更为经济。

Q1：RPMI-1640培养基可以进行高压灭菌吗？
→ 液体培养基不建议高压灭菌，应使用0.22 μm滤膜进行无菌过滤。干粉培养基可按说明（如121℃, 5分钟）进行高压灭菌。

Q2：什么情况下需要添加HEPES？
→ 当实验涉及频繁的开放式培养（如从培养箱中取出长时间操作），或实验室CO₂供应不稳定时，建议添加HEPES，终浓度为25 mM。

Q3：培养基的有效期是多久？
→ 完整的液体培养基在 2-8 ℃避光条件下，有效期通常为18个月。但一旦加入添加剂后，由于成分稳定性变化，建议在4周内使用完毕。

重要提示：本品仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗。